Множество ленти в pcr

Една от вероятните причини за множество ленти в PCR е неспецифичното отгряване на праймера. ... Твърде много цикли на PCR (повече от 30) също имат потенциала да причинят множество ленти поради увеличения шанс за грешка с всеки цикъл. Замърсяването с ДНК е друг възможен фактор.

1. Защо в гел електрофорезата има множество ленти?
2. Как отстранявате проблеми с множество ленти в PCR?
3. Какво представляват PCR лентите?
4. Защо има няколко ленти в RAPD?

Защо има много ленти в гел електрофорезата?

Матрицата на гела действа като сито: по -малките молекули на ДНК мигрират по -бързо от по -големите, така че молекулите на ДНК с различни размери се разделят на различни ленти по време на електрофорезата.

Как отстранявате проблеми с множество ленти в PCR?

Популярни отговори (1)

1. направете реакцията с отрицателна контрола (без шаблон). ...
2. Увеличете температурата на отгряване. ...
3. Препроектирайте грундовете и удължете 3 ′. ...
4. Увеличете времето за отгряване, ако неспецифичните продукти са по-къси от вашата цел. ...
5. Използвайте по -малко ДНК шаблон.
6. Опитайте докосване PCR.

Какво представляват PCR лентите?

Слабата горна лента (298 bp) идентифицира PCR продукт, амплифициран от една мишена в генома. По-ярката долна лента (238 bp) идентифицира многоцелеви PCR продукт с 10 копия на повторения в същия геном. И двата целеви региона съдържат 100% идентични места за свързване на праймерите.

Защо има няколко ленти в RAPD?

Тъй като RAPDs се генерират чрез случайно отгряване с помощта на 10-нуклеотиден праймер, може да се очаква да има редица фрагменти след всеки използван праймер. ... В зависимост от това, което сравнявате (повече или по -малко генетично свързани), броят на полиморфните ленти ще варира.